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羊的人工受精技术
发布时间:2015-01-19 13:51:39    作者:    来源:中国农业信息网

    人工授精技术可分两类三种方法:第一类为液态精液人工授精技术,又可分为二种方法,①鲜精或1∶2~4低倍稀释精液人工授精技术,一只公羊一年可配母羊500~1000只以上,比用公羊本交提高10~20倍以上。用这种方法,将采出的精液不稀释或低倍稀释,立即给母羊输精,它适用于母羊季节性发情较明显,而且数量较多的地区。②精液1∶20~50,高倍稀释人工授精技术,一只公羊一年可配种母羊10000只以上,比本交提高200倍以上。如江苏省海门市,地处长江三角洲,交通便利,多年来,利用这一技术,全市只有一个改良站制作高倍稀释精液,每乡镇设立输精点,实行统一供精,一只公羊每年配种母羊10000~15000只,精期受胎率可达90%.液态精液如果组织得不好,或在山区及交通不便而母羊较少的地区,会出现精液用不完而浪费的现象。降低了精液的利用率。第二类为冷冻精液人工授精技术,可把公羊的精液常年冷冻贮存起来,在任何地方、时间都可使用。如制作颗粒冷冻精液,一只公羊一年所采出的精液可冷冻10000~20000粒颗粒,可配母羊2500~5000只。精液用多少可解冻多少,不会造成浪费。但受胎率较低,高者在50%以上,低的只有30%~40%,其成本高,效果较差。

  现将具体操作技术分述如下:

  一、采精前的准备

  1.种公羊采精调教

  一般说,公羊采精是较容易的事情,但有些波尔山羊公羊,尤其是初次参加配种的公羊,就不太容易采出精液来,可采取以下措施:

  ①。同圈法:将不会爬跨的公羊和若干只发情母羊关在一起过几夜,或与母羊混群饲养几天后公羊便开始爬跨。

  ②。诱导法:在其他公羊配种或采精时,让被调教公羊站在一旁观看,然后诱导它爬跨。

  ③。按摩睾丸:在调教期每日定时按摩睾丸10~15分钟,或用冷水湿布擦睾丸,经几天后则会提高公羊性欲。

  ④。药物刺激:对性欲差的公羊,隔日每只注射丙睾丸素1~2毫升,连注射3次后可使公羊爬跨。

  ⑤。将发情母羊阴道沾液或尿液涂在公羊鼻端,也可刺激公羊性欲。

  ⑥。用发情母羊做台羊。

  ⑦。调整饲料,改善饲养管理,这是根本措施,若气候炎热时,应进行夜牧。

  2.器械洗涤和消毒

  人工授精所用的器械在每次使用前必须消毒,使用后要立即洗涤。新的金属器械要先擦去油渍后洗涤。方法是:先用清水冲去残留的精液或灰尘,再用少量洗衣粉洗涤,然后用清水冲去残留的洗衣粉,最后用蒸馏水冲洗1~2次。

  (1)。玻璃器皿消毒:将洗净后的玻璃器皿倒扣在网篮内,让剩余水流出后,再放入烘箱,在115℃下消毒30分钟。可用消毒杯柜或碗柜消毒,价格便宜、省电。消毒后的器皿透明,无任何污渍,才能使用,否则要重新洗涤、消毒。

  (2)。开腔器、温度计、镊子、磁盘等消毒:洗净、干燥后,在使用前1.5小时,用75%液精棉球擦试消毒。

  3.假阴道的按装、洗涤和消毒

  先把假阴道内胎(光面向里)放在外壳里边,把长出的部分(两头相等)反转套在外壳上。固定好的内胎松紧适中、匀称、平正、不起皱折和扭转。装好以后,在洗衣粉水中,用刷子刷去粘在内胎外壳上的污物,再用清水冲去洗衣粉,最后用蒸馏水冲洗内胎1~2次,自然干燥。

  在采精前1.5小时,用75%酒精棉球消毒内胎(先里后外)待用。

  附:配制75%酒精,用购买的医用酒精,一般为95%浓度,取其79毫升,加蒸馏水21毫升即为75%浓度的酒精。

  二、采精

  1.选择发情好的健康母羊作台羊,后躯应擦干净,头部固定在采精架上(架子自制,离地发情通一个羊体高)。训练好的公羊,可不用发情母羊作台羊,还可用公羊作台羊、假台羊等都能采出精液来。

  2.种公羊在采精前,用湿布将包皮周围擦干净。

  3.假阴道的准备:将消毒过的,酒精完全挥发后的内胎,用生理盐水棉球或稀释液棉球从里到外的擦试,在假阴道一端扣上消毒过并用生理盐水或稀液冲洗后甩干的集精瓶(高温低于25℃时,集精瓶夹层内要注入30℃~35℃温水)。在外壳中部生水孔注入150毫升左右的50℃~55℃温水,拧上气卡塞,套上双连球打气,使假阴道的采精口形成三角形,并好气卡。最后把消毒好的温度计插入假阴道内测温,温度在39℃~42℃为宜、在假阴道内胎的前1/3,涂抹稀释液或生理盐水作润滑剂(可不用凡士林,经多年实践不用任何润滑剂,不影响公羊射精)。就可立即用于采精。

  4.采精操作

  采精员蹲在台羊右侧后方,右手握假阴道,气卡塞向下,靠在台羊臀部,假阴道和地面约呈35度角。当公羊爬跨、伸出阴茎时,左手轻托阴茎包皮,迅速地将阴茎导入假阴道内,公羊射精动作很快,发现抬头、挺腰、前冲,表示射精完毕,全过程只有几秒钟。随着公羊从台羊身上滑下时,将假阴道取下,立即使集精瓶的一端向下坚立,打开气卡活塞,放气卡取下集精瓶(不要让假阴道内水流入精液,外壳有水要擦干),送操作室检查。采精时,必须高度集中,动作敏捷、做到稳、准、快。

  5.种公羊每天可采精1~2次,采3~5天,休息一天。必要时每天采3~4次。二次采精后,让公羊休息2小时后,再进行第三次采精。

  三、精液品质检查

  精液品质检查项目很多,这里只介绍几种常用的项目

  ①。肉眼观察:正常精液为乳白色,无味或略带腥味。凡带有腐败味,出现红色、褐色、绿色的精液均不可用于输精。公山羊正常的射精量范围是0.5~2.0毫升,平均为1.0毫升。

  ②。精子活率检查在载玻片上滴原精液或稀释后的精液1滴,加盖玻片,在38℃显微镜温度下(可按显微镜大小,自制保温箱,内装40瓦灯泡1只,既照明又保温)检查。精子运行方式:有直线前进运动,回旋运动和摆动三种。评定精子活率以直线前进运动精子百分率为依据,通常是用十级评分法。大约有80%的精子做直线前进运动的评为0.8,有60%精子做直线前进运动的为0.6,依次类推。山羊原精液活率一般可达0.8以上。但新引进的波尔山羊第一年使用活率往往较差,原精活率只有0.6,第二年就提高了。

  在检查(评定)精子活率时,要多看几个视野,并上下扭动显微镜细螺旋,观察上、中、下三层液层的精子运动情况,才能较精确的评出精子的活率。

  ③。密度检查

  估测法:在检查精子活率的同时进行精子密度的估测。在显微镜下根据精子稠密程度的不同。

  将精子密度评为“密”、“中”、“稀”三级、“密”级为精子间空隙不足一个精子长度,“中”级为精子间有1~2个精子长度空隙,“稀”级为精子间空隙超过2个精子长度以上,“稀”级不可用于输精。

  精小计数法:用血细胞计算板较精确的计算出每毫升精液中的精子数,在精液高倍稀释时,要以精子数和精子活率来计算出精液稀释倍数。计算方法是:用红细胞吸管、

  取原精液至0.5刻度处,再吸入3%的氯化钠溶液至101刻度处,将原精液稀释200倍。以母指及食指分别按吸管的两端摇均,然后弄去吸管前数滴,将吸管尖端放在计算板与盖玻片之间的空隙边缘,使吸管中的精液流入计算室(高0.1毫米),充满其中。计算板中央用刻线分成25个正方形大格,共由400个小方格组成,面积为1平方毫米。在200、400倍显微镜下数出五个大方格(四角各一个,再加中央一个大方格,共80个小方格)内的精小数。计算时以精子头部为准,位于大方格四边线条上的精子,只数相邻两边的精子,避免重复。数出四个大方格的精子总数后加7个。即为1毫升原精液的精子数。

  每毫升山羊精液中含精子数为10~50亿,平均为30亿。精子计数可10~15天进行1次。有条件的地方可用密度仪器测定。

  四、液态精液稀释配方与配制

  1.精液低倍稀释的稀释液,在精液采出后,原精数量不够时,可作低倍稀释,密度仪器测定。满足需要,并在短时间内使用,稀释液配方可简单些。如生理盐水;奶类稀释液:用鲜牛、羊奶,水浴92℃~95℃消毒15分钟,冷却去奶皮后即可使用。凡用于高倍稀释精液的稀释液,都可作低倍稀释用。

  2.精液高倍稀释的稀释液,不但是为了扩大精液量,而要延长精子的保存时间,配方很多,现介绍2个稀释液。

  (1)葡萄糖3克,柠蒙酸钠1.4克,EDTA(乙二胺四乙酸二钠)0.4克,加蒸馏水至100毫升,溶解后水浴煮沸消毒20分钟,冷却后加青霉素10万单位,链霉素0.1克,若再加10~20毫升卵黄,可延长精子存活时间。

  (2)葡萄糖5.2克、乳糖2.0克、柠檬酸钠0.3克,EDTA0.07克,三墓0.05克,蒸馏水100毫升,溶解后煮沸消毒20分钟,冷却后加庞庆大霉素1万单位,卵黄5毫升。

  五、液态精液稀释

  原精液活率在0.6以上万可用于稀释输精。

  1.精液低倍稀释,原精液量够输精时,可不必再稀释,可以直接用原精直接输精。不够时按需要量作1∶2~4倍稀释,要把稀释液加温到30℃,再把它缓慢加到原精液中,摇匀后即可使用。

  2.精液高倍稀释,要以精子数、输精剂量、每一剂量中含有1000万个前进运动精子数,结合下午最后输精时间的精子活率,来计算出精液稀释比例,在30℃下稀释(方法同前)。

  六、分装、保存和运输

  精液低倍稀释,就近输精,把它放在小瓶内,不需降温保存,短时间用毕。

  1.分装保存

  (1)小瓶中保存;把高倍稀释清液,按需要量(数个输精剂量装入小瓶,盖好盖,用蜡封口,包裹纱布,套上塑料袋,放在装有冰块的保温瓶(或保存箱)中保存,保存温度为0℃~5℃。

  (2)塑料管中保存:作者等把精液以1∶40倍稀释,以0.5毫升为一个输精剂量,注入饮料塑料吸管内(剪成20厘米长,紫外线消毒),两端用塑料封口机封口,保存在自制的泡沫塑料的保存箱内(箱底放冻好的冰袋,再放泡沫塑料隔板,把精液管用纱布包好,放在隔板上面,固定好)盖上盖子,保存温度大多在4℃~7℃,最高到9℃。精液保存10小时内使用,这种方法,可不用输精器了,经济实用。

  2.运输

  不论那种包装,精液必须固定好,尽可能减轻振动。若用摩托车送精液,要把精液箱(或保温瓶)放在背包中,背在身上。若乘汽车送精液,最好把它抱在身上。

  七、冷冻精液制作技术

  制作冷冻精液,要有很多设备,好在各省、区都有精液冷冻站,可用它来兼冻波尔山羊精液,不需增加设备,有的站已经开始冷冻波尔山羊精液,并取得较好的效果。作者等研究成功的80年代在北京市门头沟区冷冻绒山羊精液,获得情期受胎率73%的好结果,现介绍给大家,供参考。

  1.稀释液配方与配制

  Ⅰ液 葡萄糖3克、柠檬酸钠3克,加蒸馏水至100毫升,溶解后,水浴煮沸消毒20分钟,冷却后加青霉素10万单位,链霉素0.1克,取80毫升加卵黄20毫升。

  Ⅱ液 取Ⅰ液44毫升,加甘油6毫升。

  2.精液冷冻制作

  采出的精液,检查活率在0.6以上者即可冷冻,在30℃下用Ⅰ液(30℃)进行1∶1.5倍稀释,包上8层纱布放在4℃冰箱中预冷降温2~小时,在4℃下加与Ⅰ液等量的含甘油的Ⅱ液,摇匀,最终稀释比例为1∶3倍稀释,立即在氟板上滴冻成0.1毫升的颗粒。取本稀释液Ⅰ液94毫升,加甘油6毫升,合成一液,就可以冷冻细管精液。

  八、母羊发情鉴定

  1.以母羊发情外部表现来判断母羊发情

  本地母山羊发情外部表现较明显,发情时发出叫声,食欲减退,兴奋不安,对外界刺激反应敏感,摇头摆尾,有交配欲,喜欢接近公羊,在公羊追赶爬跨时常站立不动,让公羊交配;阴门肿大,流出粘液。从母羊发情的外部表现来判断母羊是否发情是比较容易的。但养羊户往往不注意,就不能确知母羊的发情开始时间,给适时输精造成困难。

  2.试精

  用试精公羊试情,能准确找出发情母羊,做到适时输精。最简便的方法是,在试情前将公羊腹部带兜上试情布(长40~45厘米,宽35~40厘米,四角缝上25~30厘米长的带子),每日早晨一次或早晚各一次将公羊放入母羊群中试情。当母羊接受公羊爬跨,站立不动,或母羊围着公羊旋转,并不断摇尾,都是母羊发情的表现,及时把它抓出,待配。

  3.试情公羊选择和饲养管理

  试情公羊必须选择体质结实、健康无病,性欲旺盛,动作灵敏的1~5岁公羊。试情公羊与母羊的比例以1∶30~40为宜。在配种前一个月驱虫,加强饲养管理,除放牧采食或舍饲喂草外,每天补饲0.2~0.3公斤混合精料。每隔10~15天,给试情公羊排精一次,增强性欲。

  九、输精

  1.输精时间

  适时输精,对提高母羊的受胎率十分重要。山羊的发情持续时间为24~48小时。排卵时间一般多在发情后期30~40小时。因此,比较适宜的输精时间应在发情中期后(即发情后12~16小时)。如以母羊外部表现来确定母羊发情的,若上午开始发情的母羊,下午与次日上午各输精1次;下午和傍晚开始发情的母羊,在次日上下午各输精1次。每天早晨1次试情的,可在上下午各输精1次。2次输精间隔8~10小时为好,至少不低于6小时。若每天早晚各1次试情的,其输精时间与以母羊外部表现来确定母羊发情相同。如母羊继续发情,可再行输精1次。

  2.母羊保定

  本文介绍一种不需输精架的倒立保定法,它没有场地限制,任何地方都可输精。保定人将母羊头夹紧在两腿之间,两手抓住母羊后腿,将其提到腹部,保定好不让羊动,母羊成倒立状。用温布把母羊外阴部擦干净,即待输精

  3.输精方法

  (1)。子宫颈口内输精:将经消毒后在1%氯化钠溶液浸涮过的开膣器装上照明灯(可自制),轻缓地插入阴道,打开阴道,找到子宫颈口,将吸有精液的输精器通过开膣器插入子宫颈口内,深度约1厘米左右。稍退开膣器,输入精液,先把输精器退出,后退出开膣器。进行下只羊输精时,把开膣器放在清水中,用布洗去粘在上面的阴道粘液和污物,擦干后再在1%氯化钠溶液浸涮过;用生理盐水棉球或稀释液棉球,将输精器上粘的粘液,污物自口向后擦去。

  (2)。阴输精:将装有精液的塑料管从保存箱中取出(需多少支取多少支,余下精液仍盖好),放在室温中升温2~3分钟后,将管子的一端封口剪开,挤1小滴镜检活率合格后,将剪开的一端从母羊阴门向阴道深部缓慢插入,到有阻力时停止,再剪去上端封口,精液自然流入阴道底部,拔出管子,把母羊轻轻放下,输精完毕,再进行下只母羊输精。

  装在小瓶中保存的高倍稀释精液,要用输精器吸入后再输精(余下精液仍在0~5℃下保存),可作子宫颈口内或阴道输精。液态精液情期受胎率方,80%以上。有人做过试验,阴道输精的情期受胎率比子宫颈口内输精的降低不到2%.所以说情期液态精液可以阴道输精,而且塑料管又可代替输精器,便于推广应用。冷冻精液必须进行子宫颈口内输精,否则会降低受胎率。有条件用腹腔镜子宫角内输精,能使冷冻精液受胎率提高。

  原精输精每只羊每次输精0.05~0.1毫升,低倍稀释为0.1~0.2毫升,高倍稀释为0.2~0.5毫升,冷冻精液为0.2毫升以上。

  5.冷冻精液解冻

  解冻好坏对解冻后活率有很大影响。本人采用40℃水温解冻颗粒精液,先把小试管用维生素B12(每支含0.5毫克)冲洗一下,留一点B12,并快速在40℃水中摇动至2/3融化,取出试管继续速摇至全部融,解冻后活率较好,可试试。

  另外,建议做一个泡沫塑料小盒,倒上液氮,再把冷冻精液袋放入氮液中,这样可避免未解冻的颗粒精液,因升温又入液氮降温,影响活率。

  十、所需器材、药品、用品、表格

  1.所需器材、药品、用品

  所需物品大部分已在文章中提到了。用于配制稀释液的药品、试剂:如葡萄糖要一水的、柠檬酸钠、EDTA(乙二胺四乙酸二钠)都要分析纯的,青、链霉素不要过期的,卵黄需新鲜鸡蛋,要用不加水的鲜奶。假阴道内胎,玻璃器皿易破损的物品要多准备一些。显微镜保温箱、开膣器照明灯、精液保存箱等能自己做的尽可能自己做,在实践中要有所创新。如要开展冷冻精液输精,要配备好液氮罐。

  2.表格

  有种公羊精液品质检查表;母羊配种记录表;精液使用登记表,及日常事务记录等,各项记录必须按时、准确填写。是为了统计分析,总结经验,改进工作。

  十一、建立人工授精站和输精点

  地处平川的,可象江苏省海门市那样全市就改良站制作高倍稀释精液,负责统一供精,每个镇兽医站设一个输精点,负责农户母羊输精。地处山区的,可划片建立人工授精站,全县可建2~3个人工授精站,在乡镇或母羊多的村设输精点。若采用冷冻精液输精,县里又无精液冷冻设备,人工授精站可统一购买冷冻精液,转给各乡镇输精点,每点配备液氮罐,由人工授精站定期到各输精点添加液氮。有条件地地方也可购置冷冻精液设备,饲养波尔山羊公羊,自己制作冷冻精液,也是可以的。但不能提倡,因为我国现有冷冻精液设备,已够用的了。还可在配种季节,季节性的集中母羊,建立短期的人工授精站,采用鲜精或低倍稀释精液输精,到配种季节末结束。各地可根据具体情况,采用、创新。

  1.建立人工授精站的条件和基本建设

  人工授精站应建立在背风、向阳、干燥、有水源、牧草地面积大或有较多的农田,无疾病流行史,交通便,母羊数量多,又是一县的中心地带,这样便于每天送或取精液,因为高倍稀释精液,当天精液只能当天使用,第二天使用就要降低受胎率,就得天天取送精液,设在边远地区就不方便了。人工授精站设有:采精室(兼作输精室)、精液处理室(要有顶棚)、公羊圈舍、母羊圈、饲料间、兽医室、工作人员宿舍等。

  2.建立输精点的条件

  设在母羊较集中,交通较方便的地方,把点设在乡、镇兽医站也可以,不论是用摩托车还是乘公共汽车取或送精液,在上午10时前精液必须到各输精点,这样单程不能超过2小时,山区最远点距人工授精站20~30公里,平川可远到50公里以外。各地可根据当地的具体条件来建点。输精点设有:输精室、母羊舍(供发情母羊过夜)、工作人员宿舍等。

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